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分享一下abcam抗體的保存方法及注意事項
更新時間:2019-01-16   點擊次數:4947次
   分享一下abcam抗體的保存方法及注意事項,一起來看看。

  1、abcam抗體的保存溫度

  對于許多抗體而言,分裝為小等份在 -20 ℃ 或 -80 ℃ 下凍存是正好的保存條件。分裝抗體可以大限度減少凍融對抗體造成的損壞,還可避免多次從同一管中移取抗體而引入污染。分裝后抗體只可凍融一次,如有剩余,應保存在 4 ℃ 下。

  收到抗體后,請以 10,000 × g 離心 20 秒,沉降滯留在管蓋螺紋中的溶液,然后分裝抗體并將其轉移至低蛋白質結合的微量離心管中。分裝抗體的量取決于您在實驗中常用的量。分裝抗體應不少于 10 μL;分裝抗體量越少,濃度就越容易受到蒸發(fā)以及儲存樣品管表面吸附的影響。

  在大部分情況下,可在收到抗體之后立即將其保存于 4 ℃ 下,可保存 1 至 2 周。遵循數據表上的保存建議非常重要。

  ?2、abcam抗體的存放注意事項

  切勿凍存酶偶聯抗體,而應將其保存在 4 ℃ 下。凍融不僅會影響抗體的結合能力,還會降低酶活性。

  偶聯抗體(無論是偶聯有熒光染料、酶還是生物素)應保存在深色樣品瓶中或用錫箔紙包裹樣品瓶。暴露于光下會影響偶聯物的活性。熒光偶聯物尤其容易發(fā)生光致漂白,因此在實驗各階段都應避光保存。

  IgG3 同型抗體的*之處在于其解凍后容易形成聚集體,因此應始終保存在 4 ℃ 下。

  腹水液中可能含有蛋白酶,因此收到后應盡快凍存。

  ?3、abcam抗體防止污染

  為了防止微生物污染,可將疊化鈉加入抗體制備物中,疊化鈉的終濃度為 0.02% (w/v)。我們的多款抗體中都含有這種保護劑,其濃度范圍為 0.02%-0.05%。數據表的保存緩沖液部分將對此進行說明。

  不使用疊化鈉的情況

  如果要用抗體對活細胞進行染色或處理,或者要用抗體進行體內研究,請務必使用不含疊化鈉的制備物。這種抗菌劑對大部分生物體都有毒害作用:它會阻斷細胞色素電子傳遞系統(tǒng)。

  疊化鈉會干擾涉及胺基的所有偶聯反應,因此必須在進行偶聯反應之前將其去除。完成偶聯反應之后,可使用疊化鈉保存抗體。另一種可用的抗菌劑是 0.01% 硫柳汞鈉(硫柳汞),這種物質不含伯胺。

  抗體溶液中的疊化鈉可通過滲析或凝膠過濾去除。IgG 的分子量為 150,000 Da(IgM 約為 600,000 Da),疊化鈉的分子量為 65 Da。截留分子量為 14,000 Da 的微滲析裝置可使疊化物順利擴散出去,而抗體得以保留。

  滲析過程在燒杯中(置于磁力攪拌器上,溫度保持 4 ℃)進行,每毫升抗體使用至少 1 升預冷的 PBS,攪拌滲析裝置 6 小時。更換 PBS 兩次,每次更換后均攪拌至少 6 小時。如有可能,所有材料都應滅菌,并且應在無菌條件下處理所得制備物。

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