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NobleRyder DNA退火緩沖液(5×) 即用型試劑

  • 型   號:N6822
  • 價   格:
  • 更新時間:2024-09-18
  • 廠家性質(zhì):經(jīng)銷商

NobleRyder DNA退火緩沖液(5×) 即用型試劑
NobleRyder DNA退火緩沖液(5×) 即用型液體試劑N6822-1ml

DNA退火緩沖液(5×)

產(chǎn)品簡介:

DNA寡核苷酸退火緩沖液(Annealing Buffer for DNA Oligos)簡稱為DNA退火緩沖液,是一種可用于DNA oligo退火的緩沖液,可用于常規(guī)的DNA oligo的退火,尤其適合于較難退火的用于RNAi (也稱siRNA)質(zhì)粒構(gòu)建的DNA oligo的退火。由于RNAi質(zhì)粒構(gòu)建的DNA oligo通常由于含有約20個左右的互補序列,自身易形成發(fā)夾結(jié)構(gòu),從而影響兩條DNA oligo的正確退火。

NobleRyder Annealing Buffer for DNA Oligos(5×)能有效避免DNA oligo自身形成發(fā)夾結(jié)構(gòu),并且兩條oligo退火后可以直接和經(jīng)酶切、純化的質(zhì)粒連接,轉(zhuǎn)化后可以得到大量的陽性克隆。該本試劑操作簡單,只需把待退火的DNA oligoAnnealing Buffer for DNA Oligos(5×)按照一定比例混合后,置于PCR儀上進行程序降溫,約90min即可完成。

 NobleRyder DNA退火緩沖液(5×) 即用型試劑

產(chǎn)品組成:

                                    編號

名稱

N6822

Storage

試劑(A): Annealing Buffer for DNA Oligos(5×)

1ml

-20℃

試劑(B): Nuclease-Free Water

5ml

RT

使用說明書

1份

 

操作步驟(僅供參考)

1、 把待退火的DNA oligo用經(jīng)滅菌的超純水或Nuclease-Free Water配制成50μM,同時溶解Annealing Buffer for DNA Oligos(5×),混勻備用

2、 按如下退火反應體系操作:

   N uclease-Free Water

40μl

    Annealing Buffer for DNA        Oligos(5×)

20μl

DNA oligo A(50μM)

20μl

DNA oligo B(50μM)

20μl

Tatal

100μl

按照上述順序,依次加入并混勻,如果所用PCR儀沒有加熱蓋,可加入Mineral Oil防止液體揮發(fā)。

3、 按如下PCR儀的退火條件:

 

步驟

溫度

時間

作用

1

95℃

2min

Oligo充分變性

2

每90s下降1℃,降至25℃

約90min

程序退火

3

4℃

長期保存

暫時存放

 

4、退火后可直接用于連接反應,也可以-20℃凍存?zhèn)溆谩H绻嘶鸾Y(jié)束后打算進行酶切等其它反應,最好用純化試劑盒進行純化,或者確保退火產(chǎn)物在反應體系中體積不超過5%,以避免Annealing Buffer對后續(xù)的酶反應體系的干擾。

 

注意事項:

1.避免反復凍融,以免效率下降。

2.該試劑只適合于DNA oligo的退火,不適用于RNA oligo 的退火。

3.為了您的安全和健康,請穿實驗服并戴一次性手套操作。

 

有效期: 12個月有效。

NobleRyder DNA退火緩沖液(5×) 即用型試劑

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